監測報告基因(Reporter Gene)
rhTNF-α刺激誘導的HEK293 細胞中,rhGFP 報告基因表達的 NF-κB 的活性。在用pNF-κB-rhGFP 報告基因轉染的 HEK293 細胞中,用 3 倍稀釋的rhTNF-α處理。圖像以15min 為間隔獲得。對象飽和度(Object Confluence)表示報告基因的表達和/或啟動子的活性。
關鍵特征(與傳統的終點熒光素酶方法對比)
1)數據豐富:可獲得終 點法無法得到的多個時間點的實時動態的圖像和數據;
2)節約成本:無需裂解,無需熒光 素酶法需要的終端反應底物,節省時間和花費;
3)方便:動態的數據使用戶能在單個的實驗中優化信號窗(signal window),無需事先決定何時終止實驗;
4)敏感:可得到每個條 件下的多個時間點數據,增加了實驗的定量性(quantitative robustness);
5)可定制: 用戶可根據需要定制啟動子,修改反應體系,監測藥物對報告基因的作用。
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